大家好,小式来为大家解答以上的问题。引物长度17bp可以吗，引物长度这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！

1、引物浓度：引物浓度尽量按照酶的说明书给的浓度，自己再那个浓度再设置一个范围去摸索一下。

2、也可以按照师兄师姐给的经验浓度自己去摸索一下，因为有时候说明书给的参数会是错的！这个真的很坑，所以第一次做的实验一定要找师兄师姐问清楚具体的参数和细节，避免走弯路、浪费试剂。

3、不同的酶对引物浓度也可能会有点差别。

4、引物浓度太低或太高了都会导致P不出来。

5、有极少数情况，可能引物公司合成回来的引物F/R不对，比如R引物少了一半，所以引物溶解之后测一下浓度，自己根据OD和引物长度对应的摩尔量换算一下看对不对，但是这样的情况很少，我三年只遇到过一次，这样公司真的很坑爹！（因为我一模一样的重复了两次EMSA，发现结果跟之前的不对，最后排除问题发现是引物的一条少了一半，当时浪费了我一整天的时间，真的很心酸，这种奇葩的问题都能被我遇到。

6、）如果是的话，和公司反应重新合成就行了。

7、还有就是引物是否降解。

8、引物设计是否合理：这个你可以设计好之后，让师兄师姐帮忙检查一下，避免设计的引物有问题，导致后面实验不断重复还找不到原因。

9、3）DNA聚合酶：我们实验室用的是KOD FX，这个酶很好用，扩增能力很强，保真性也挺高。

10、酶要保存在-20，用的时候也要放在冰上，加完就尽快放回-20，这样对酶的保护是比较好的，避免因为保存不当，一管酶用到后面活性下降了，导致扩增不出来。

11、有时候一种酶扩增不出来就换一种试试，实验只能不断尝试了，失败多了就有自己的经验了。

12、用之前一定要认真看说明书，有时候认真看了说明书，你还能学到一些知识。

13、引物的长度一般为15～30bp，常用的是18～27bp，但不应大于35bp ，第一，引物长度过短，会导致引物可配对区域增多，非特异性扩增增加。

14、这将不利于PCR反应进行和获得目的基因产物。

15、第二，引物长度太长。

16、引物过长会导致其延伸温度变高，不适于Taq DNA聚合酶进行反应。

17、因此引物设计要求引物长短合适。

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